Mathieu Bertholet absolvierte den Studiengang Szenisches Schreiben an der UdK Berlin. Für sein erstes Stück Farben erhielt er 2001 den Förderpreis des Deutschen Schauspielhauses Hamburg und den Prix Europa 2009.

Von 2006 bis 2009 war Mathieu Bertholet Hausautor am Théâtre du Grütli in Genf. Während dieses Engagements trat er auch als Tänzer in Solos von Cindy van Acker und Foofwa D’Imobilité auf und gründete seine eigene Kompanie mufuthe, mit der er seine Stücke zur Uraufführung brachte. Daneben lehrt er Szenisches Schreiben an der ENSATT in Lyon und ist Studienleiter an der Schauspielschule La Manufacture in Lausanne. Sein Stück L’avenir, seulement, inszenierte er selbst im im Théâtre de Gennevilliers in Paris.